EmporeTM SDB-XC和C18固相萃取膜（47mm）应用于水样中去甲氯胺酮萃取

前言：

氯胺酮，全名为 2-邻氯苯基-2-甲氨基环己酮，是苯环已哌啶（PCP）的衍生物。氯胺酮是一种通用的速效解离麻醉剂，被列为第一类精神药品进行管控[2,3]。

毒品犯罪会引发一系列的社会问题，例如为获取毒资而引起的盗抢、杀人案件，又如吸毒产生幻觉后行为失控引起的暴力行为等，进而对社会稳定构成极大的威胁。毒品犯罪也是各国政府严格防控的一类犯罪 [4]。

在本实验中，对比使用SDB-XC和C18两种填料萃取膜（47mm）处理1升去甲氯胺酮加标水样，并用8mL甲醇进行洗脱。然后通过LC-MS/MS分析。

1， 实验过程

1.1 仪器与试剂 

所有试剂均为分析纯或更高。

去甲氯胺酮（1000μg/mL,甲醇），购自坛墨质检标准物质中心；

甲醇（色谱纯），购自赛默飞世尔科技（中国）有限公司；

纯净水，产自Milli-Q® EQ 7000系统，美国密理博Millipore公司；

EmporeTM固相萃取柱盘：SDB-XC（47mm，货号：98-0604-0223-1），C18（47mm，货号：98-0604-0217-3），均购自美国CDS公司；

Qprep 固相萃取装置，北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

液质联用仪：SCIEX Exion LC™液相系统+ Triple Quad™ 4500质谱系统，SCIEX公司； 

1.2 工作液配制 

去甲氯胺酮使用溶液：100ng/mL，溶剂体系为甲醇；

1.3 实验

1.3.1 样品制备  

将1000mL自来水样品倒入1L样品瓶，加入100μL去甲氯胺酮使用溶液（100ng/mL），加标浓度为0.01ng/mL。

1.3.2 净化与浓缩

分别将SDB-XC（47mm）和C18萃取膜，加载到Qprep固相萃取装置，用10mL甲醇和10mL纯水进行活化，然后进行上样富集，上样结束后，用8mL甲醇进行洗脱。

洗脱液经40℃氮吹浓缩至近干，加入乙腈+水（4+1）定容至1mL。洗脱液过0.22μm滤膜后，待LC-MS/MS分析。

1.3.3 LC-MS分析

LC条件：

色谱柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；

柱温：25℃；

进样量：5μL；

流动相：

A:乙酸铵水溶液（20mmol/L），B: 乙腈（梯度洗脱程序见表1）；

流速：0.2mL/min；

MS条件：

IS电压：5500V； 

气帘气CUR: 35 psi；

雾化气GS1: 45 psi ；

辅助气GS2: 45 psi；

离子源温度: 400 ℃ ；

碰撞气CAD:  9 psi；

检测方式：正离子模式，多反应监测（MRM）。

去甲氯胺酮：

定量离子对238.1-125.1，

定性离子对238.1-179.1；

表1 液相色谱梯度洗脱条件

2, 实验结果 

图1 自来水空白总离子流图

图2 加标总离子流图（C18膜）

图3 加标总离子流图（SDB-XC膜）

加标回收率：

C18膜（47mm）: 89.4%；

SDB-XC膜（47mm）:69.8%。

3，结果与讨论 

实验使用CDS-Empore^TM SDB-XC、C18不同填料膜片，对水样中去甲氯胺酮进行富集提取，并通过LC-MS/MS进行定量，加标浓度为0.01ng/mL（ppb）。实验表明：水样中去甲氯胺酮的回收率分别为89.4%（C18膜）和69.8%（SDB-XC膜）。初步判定两种膜均可用于自来水中痕量去甲氯胺酮的检测分析。该分析方法的稳定性有待进一步验证。

4，参考文献 （等线，标题2，小四，加粗）

[1] Lygrisse J , Lapp M , Witherspoon K . Detection and quantification of ketamine HCl in alcohol/water matrices using ESI-MSn and LC-ESI-MS. Wichita State University. Graduate School, 2009.

[2] Singh P , Pratap K , Kinjavdekar P , et al. Xylazine, ketamine and their combination for lumbar epidural analgesia in water buffalo calves (Bubalus bubalis).[J]. Transboundary & Emerging Diseases, 2010, 53(8):423-431.

[3] Maddah B , Alimardani V , Moradifard H . A simple colorimetric kit for determination of ketamine hydrochloride in water samples[J]. Analytical Methods, 2015, 7(24):10.1039.C5AY01899D.

[4] Neufeld M , D Spence, Water T . Working in the dark: A hermeneutic inquiry into health professionals stories of ketamine sedation with children[J]. Contemporary Nurse, 2017:1.